ЮРіЯ-ФАРМ осуществляет полный цикл разработки лекарственных средств на основе рекомбинантных белков.
У нас есть полный контроль над всеми этапами разработки биофармацевтических препаратов: от идеи до пилотного производства. Это включает в себя:
- дизайн архитектуры экспрессирующих векторов;
- продукт-специфический скрининг бибилиотек экспрессирующих векторов;
- получение стабильных пулов клеток-продуцентов;
- генерация стабильных клональных клеточных линий;
- скрининг клональных клеточных линий в соответствии с критически важными параметрами качества (CQA) продукта Product CQA-guided clonal cell lines screening;
- разработка восходящего процесса (включая непрерывное культивирование высокоплотных клеточных культур);
- разработка процесса очистки (в том числе в порционном и непрерывном режимах работы);
- масштабирование процессов и пилотное производство.
Все виды деятельности поддерживаются современными аналитическими технологиями с аналитическими процедурами, разработанными собственной командой в соответствии с концепцией Quality-by-Design, обеспечивающей качество продукта еще на этапах его разработки.
Наша экспертиза основана на разнообразном опыте разработки и экспрессии рекомбинантных белковых лекарственных средств, таких как моноклональные антитела (которые также производятся в клеточных линиях CHO и SP2/0), фьюжн-белки, включая трудноэкспрессирующие молекулы, такие как факторы роста семейства TGF-b и т.д.
Работая над исследованиями и разработкой процессов, мы не только используем самые современные методы, но и создаем свои решения, направленные на повышение эффективности, сокращение времени выхода на рынок и разрабатываем подходы, прицельно адаптированные к каждому продукту.
Ключевые решения, разработанные нашей компанией:
- продуктивная клеточная линия на основе CHO DG44;
- клеточная линия специально адаптирована для культивирования с высокой плотностью клеток;
- специально разработанная система селекции основана на DHFR и адаптирована для работы с низкими концентрациями метотрексата без амплификации, селекция высокопроизводительных стабильных пулов;
- продемонстрированная инженерия клеточных линий для оптимизации специфических критических параметров качества (модификация гликозилирования, котрансляционный процессинг белков) позволяет снизить риски в проектах разработки биосимиляров;
- оптимизированная высокопроизводительная стратегия клонирования на основе FACS с оценкой производительности отдельных клеток методом проточной цитометрии
- PUZZLEX платформа для сбора экспрессирующих векторов:
- модульная система для сбора векторов позволяет генерировать библиотеки «бесшовных» векторов для трансфекции стабильных пулов клеток;
- сотни экспериментально подтвержденных модулей (промоторы, UTR, сигнальные пептиды, сигналы полиаденилирования и т.п.), готовые к клонированию в экспрессионные векторы;
- твердофазный сбор плазмид позволяет генерировать мультицистронные векторы (до четырех цистронов, экспериментально проверенных) в формате 384-луночной плашки;
- полностью автоматизированный процесс генерации векторов, обеспечиваемый автоматической системой переноса жидкостей.
- COMPREHENSIVE – комплексная платформа профилирования клональных клеточных линий (на основе низкопоточных аналитических систем):
- платформа оценки критически важных параметров качества (CQA) в нанограммовом масштабе;
- подтверждение первичной последовательности, идентификация и количественная оценка гликоформ, клипинг, профиль окисления/дезамидирования и оценка других важных аналитических характеристик;
- подтверждение первичной аминокислотной последовательности, идентификация и количественная оценка гликоформ, клипинг, профиль окисления/дезамидирования и оценка других важных аналитических характеристик;
- возможность выполнять профилирование CQA на ранней стадии процесса масштабирования мини-пулов/клоновПерфузійний виробничий процес та застосування хроматографії неперервного захоплення (continuous capture chromatography)
- Установлены и экспериментально подтверждены самые современные уменьшенные модели перфузионных процессов (SpinTubes, микробиореакторы ambr15, перфузионная система 3L TFF/ATF):
- DoE methodology-guided оптимизация процесса перфузии, основанная на методологии планирования эксперимента;
- комплексное метаболомное профилирование культуральных сред и линий клеток-продуцентов для дальнейшей оптимизации сред и процессов;
- технология непрерывного захвата продукта с 2 колонками позволяет наиболее эффективно использовать аффинные носители, минимизируя время удержания и обработки, CAPEX/OPEX, а также уменьшить площадь производственных помещений.
Аналитическая разработка
ЮРіЯ-ФАРМ разработала и осуществила оценку полного набора платформенных аналитических методологий, способных предоставить максимум информации о качестве рекомбинантного белкового продукта:
- UHPLC – интактная масс-спектрометрия (восстановленная, невосстановленная, после фрагментации (Fabalactica, IdeS))
- пептидный маппинг с использованием разделения UPLC-MS/MS или CE-MS/MS; восстановленный, невосстановленный;
- SEC-UHPLC-TDA;
- CZE, CIEF, CE-SDS;
- гликопрофилирование с помощью HILIC-UPLC, CE, PGC-CHIP;
- DSC/DSF (профилирование высокоуровневых структур);
- FcRs, C1q, профилирование других параметров кинетики связывани;я
- другое.
ЮРіЯ-ФАРМ также разработала уникальное аналитическое решение, основанное на системе низкопоточной хроматографии для всесторонней характеристики CQA целевого продукта. Данная платформа применяет многоатрибутный метод (MAM) на самых ранних стадиях отбора пулов и клонов (платформа COMPREHENSIVE), позволяющая на основе полученных данных принимать решения по отбору линий клеток-продуцентов для опытных и мастер-банков клеток. Кроме внутренних проектов, наша аналитическая платформа может выполнять автономные аналитические задачи для поддержания потребностей вашего проекта.
Решения для разработки
ЮРіЯ-ФАРМ разрабатывает уникальную двухступенчатую платформу фагового дисплея для аффинного отбора антител.
YPhAGE платформа позволяет проводить скрининг связывания веществ в полноразмерном формате еще в начале поисковой кампании, не утрачивая преимущества разнообразия фаговых библиотек.
Все риски и дополнительное время/расходы, связанные с гуманизацией, устраняются путем прямого использования human IgG framework.
Наши лабораторные мощности позволяют анализировать генные библиотеки с количеством образцов до 10 ^11, а также обеспечивают возможность дальнейшего скрининга эпитопов на основе BLI (bio-layer interferometry). Таким образом, мы можем отбирать пулы молекул с оптимальной специфичностью и эффективностью связывания, при этом значительно снижая риски, связанные с процессами разработки полноразмерных антител.
Каждая отобранная молекула характеризуется согласно:
- кинетики связывания и специфичности (BLI, проточная цитометрия, биологические методы исследований);
- активности (FcRs, C1q binding, ADCC, CDC);
- пригодности к производству (SEC-HPLC-TDA, DSF, Intact MS etc.)
Рабочий процесс позволяет генерировать стабильные клеточные пулы для крупномасштабного производства выбранного варианта антитела.
В настоящее время с целью демонстрации возможностей платформы проводятся исследования на выбранных антигенах.
Если Вас заинтересовали преимущества платформы YPhAGE, мы открыты для сотрудничества в проектах с вашими целевыми молекулами.